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尊龙凯时助力肺癌治疗研究中的谷胱甘肽(GSH)检测

发布时间:2025-07-21   信息来源:尊龙凯时官方编辑

尊龙凯时的背景介绍:谷胱甘肽(GSH)作为细胞内关键的抗氧化剂,其水平的变化直接反映了肿瘤细胞的氧化还原状态。肺癌细胞往往依赖于较高的GSH水平来抵御放化疗过程中产生的活性氧(ROS),这使得肿瘤细胞可能出现治疗抵抗现象。GSH作为谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的辅因子,可以抑制铁死亡,而过度消耗GSH则会导致GPX4失活,最终促进铁死亡的发生。因此,GSH水平的变化被认为是铁死亡的重要标志。动态检测GSH水平能够有效评估治疗是否激活了氧化应激与铁死亡的通路。此外,监测GSH的变化也将有助于验证GSH响应性药物的释放效率,以实现肿瘤的特异性激活。

尊龙凯时助力肺癌治疗研究中的谷胱甘肽(GSH)检测

尊龙凯时在肺癌治疗研究中的应用:2025年5月8日,复旦大学药学院的陈依婷博士及其团队在《Journal of Nanobiotechnology》(IF=106)发表了一项研究,题为“基于多不饱和脂肪酸的吸入式仿生纳米反应器增强铁死亡以增强肺癌放疗疗效”。本研究团队设计了一种名为DHA-N@M的基于多不饱和脂肪酸(PUFA)的纳米反应器,采用吸入给药方式以靶向肺部肿瘤。该纳米反应器由巨噬细胞膜包裹的GSH响应性释放NO的PUFA衍生物DHA-SNO构成,兼具肿瘤靶向性和GSH响应特性。实验结果表明,DHA-N@M显著提高了药物在肺肿瘤中的蓄积量,效果优于静脉注射。其机制为通过消耗GSH、释放NO并生成ONOO⁻来诱导肿瘤细胞的铁死亡,与放疗联用能够协同增强抗肿瘤效果。在肺癌原位模型中,DHA-N@M联合放疗展现出高达9391%的肿瘤抑制率,并且表现出良好的安全性。这项研究为肺癌治疗提供了一种新型的吸入式纳米药物递送系统,借助靶向肿瘤微环境和增强铁死亡,显著提升了放疗效果,具有重要的临床转化潜力。

尊龙凯时的谷胱甘肽检测试剂盒(abs580006)使用指南如下:

试剂盒组分

组分规格及储存条件:

  • 96孔微板 1 plate —
  • 检测缓冲液 30 mL × 4 ℃
  • 反应缓冲液 8 mL × 1 4℃
  • 染料试剂 粉末 × 1 4℃,避光保存
  • 稀释液 4 mL × 1 4℃
  • 标准品 粉末 × 1 4℃,避光保存
  • 操作手册 1 Manual —

操作步骤

1. 材料与试剂准备

自备材料包括:酶标仪、蒸馏水、移液器及枪头、研钵、离心机、计时器、湿冰等。

标准品的制备:使用前将0.065 mL蒸馏水加入标准品管中,混匀至完全溶解;然后取0.05 mL溶液加入0.95 mL蒸馏水中混合均匀,获得浓度为0.5 mmol/L的标准品溶液,置于4°C储存。

2. 样本处理

(1) 细胞/细菌样本:将5×106个细胞/细菌收集到离心管中,离心后去除上清液,加入1 mL检测缓冲液,超声处理(功率20%,超声3s,间隔10s,重复30次),然后在4℃下以8000g离心10分钟,转移上清液至新离心管中,在湿冰上保存待测。

(2) 组织样本:称取0.1g组织,加入1 mL检测缓冲液在湿冰上匀浆,4℃以8000g离心10分钟,转移上清液至新离心管中,在湿冰上保存待测。

(3) 血清/血浆样本:可直接进行检测。

3. 上样及检测

上样前将所有试剂加热至37℃,随后按照下表进行加样:

试剂 空白对照孔 标准品孔 样品孔
Sample -- 80 μL 80 μL
Standard 80 μL -- --
Distilled water 80 μL -- --
Reaction Buffer 80 μL 80 μL 80 μL
Dye Reagent 40 μL 40 μL 40 μL

混合均匀后在37℃孵育10分钟,并在412nm处测量并记录吸光度。

注:标准品可以进行2倍连续稀释(大约6个点),以生成标准曲线;对于未知样品,建议挑选几个样品进行预实验,以确定样品浓度和稀释倍数。

4. 标准曲线

标准曲线仅作参考,每次实验都必须绘制新标准曲线。检测范围为0.01 mmol/L-0.5 mmol/L。

常见问题解答

Q1:试剂盒中的96孔微板不足,如何处理?

A1:该试剂盒中的96孔板是免费提供的,后续实验可以使用常规的96孔酶标板替代。

Q2:操作说明书中的标准曲线法和公式法,我该选择哪种?

A2:两种方式任选其一,公式是较为简便的计算方法,建议使用标准曲线法,会更精准。需注意的是,采用标准曲线法时,每次实验必须重新绘制标准曲线。

Q3:若反应出现沉淀,怎么办?

A3:沉淀多因蛋白质浓度过高,建议将样品吸出离心,取上清再进行检测,或将样品放入离心管中离心后取上清再加至孔板中检测。

Q4:若仪器无相应检测波长怎么办?

A4:若仪器设定中没有推荐的检测波长,请在说明书推荐波长附近进行选择,通常在±10nm范围内均可。

尊龙凯时的产品线与服务特点将为生物医疗领域的研究提供广泛的支持与创新!